Desarrollo y validación de un método de ensayo inmunoenzimático modificado para la detección de anticuerpos IgG contra el VHE a partir de muestras de manchas de sangre seca en entornos endémicos.

La evaluación serológica es una parte integral de la observación de laboratorio en estos días. El objetivo de la presente investigación era desarrollar y validar un ensayo inmunoenzimático (ELISA) modificado para determinar la fuerza de voluntad de los anticuerpos IgG frente al virus de la hepatitis E (VHE) utilizando manchas de sangre seca (SPS) y las correspondientes muestras de plasma.

Se analizó un total de 65 muestras (45 pacientes con VHE y 20 controles sanos). Las muestras de sangre seca y de plasma mostraron densidades ópticas iguales para la detección de IgG anti-VHE. Se observó una correlación extremadamente vital entre las absorbancias de los patrones de plasma y de las muestras de sangre seca (R2= 0,98; p <0,001) a una dilución de 1:200, lo que indicaba un verdadero asentamiento entre los 2 procedimientos.

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El ensayo exhibió una linealidad de primera clase y no confirmó ningún impacto del hematocrito fisiológico en la eficacia del ensayo. Los conocimientos adquiridos resultaron prometedores y recomendables para la utilización de muestras de sangre seca como alternativa aceptable a las muestras de plasma para la detección de anticuerpos IgG contra el VHE, evidenciada por una correlación vital con los resultados del plasma. En consecuencia, se recomienda una metodología equivalente para el procesamiento de muestras de sangre seca y su almacenamiento correcto para la aplicación de un ELISA modificado en diversos entornos.

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ELISA-1 Alpha Diagnostics
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Un caso de glomerulonefritis proliferativa con depósitos monoclonales de IgG (PGNMID) que respondió favorablemente al tratamiento con esteroides

La glomerulonefritis proliferativa con depósitos de inmunoglobulina monoclonal (PGNMID) suele tener un mal pronóstico y el consenso es que debe tratarse con un tratamiento dirigido a los clones. Sin embargo, el pronóstico de la PGNMID es heterogéneo y algunos casos se han tratado eficazmente con diferentes métodos terapéuticos.

Presentamos aquí un caso de PGNMID que respondió favorablemente a los esteroides sin tratamiento dirigido a clones. Una chica de 18 años fue remitida a un nefrólogo con proteinuria detectada en un chequeo anual. En un intervalo de 3 años, el foco de creatinina (Cr) aumentó de 0,76 a 1,00 mg/dL y la proteinuria de 0,35 a 1,9 g/g Cr.

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No se detectaron gammapatías monoclonales en su suero ni en su orina. Basándose principalmente en los hallazgos de la biopsia renal a la edad de 21 años, se reconoció que la afectada padecía glomerulonefritis proliferativa con depósitos monoclonales IgG1-kappa.

La característica histológica era glomerulonefritis proliferativa mesangial con glomeruloesclerosis superior, que es una presentación poco frecuente de la GNMPID. Se inició un tratamiento intravenoso con metilprednisolona en pulsos, seguido de prednisolona oral en dosis de 30 mg diarios.

Custom development of ELISAs for other species or antibody isotypes not listed in the catalog. Custom testing of samples for IgG/IgM/IgA or total (IgG+IgM+IgA)
000-CUS Alpha Diagnostics
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00002 Cusabio
Alpha-bungarotoxin, CF405s
00002-100ug Biotium
Alpha-bungarotoxin, CF680r
9-00003 Biotium
Alpha-bungarotoxin, CF680r
9-00003 Biotium

12 meses después, una segunda biopsia renal reveló una disminución importante de los depósitos mesangiales de IgG1-kappa. La prednisolona se redujo regularmente y se suspendió 2 años después de la biopsia renal primaria. En el momento de la retirada de la prednisolona, el análisis de orina confirmó proteinuria de 0,2 g/g Cr sin hematuria. El rendimiento renal se mantuvo seguro durante todo el intervalo terapéutico.

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La PKC-e regula el suministro de vesículas y la exocitosis focal para la fagocitosis mediada por IgG respetuosa con el medio ambiente

La PKC-e es necesaria para la adición de membranas a lo largo de la fagocitosis mediada por IgG; su función en este proceso no está bien definida. Las imágenes de decisión excesiva revelaron que la PKC-e sale del Golgi y entra en los fagosomas en vesículas que luego se fusionan.

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El TNF y la PKC-e se colocalizan en el Golgi y en las vesículas que entran en el fagosoma. La falta de suministro de PKC-e y TNF tras el tratamiento con nocodazol confirmó el transporte vesicular sobre microtúbulos. El hecho de que las vesículas de TNF+ no se liberen en macrófagos de ratones PKC-e nulos, o tras la disociación del pool de PKC-e asociado al Golgi, implica a la PKC-e ligada al Golgi como impulsora del tráfico del Golgi al fagosoma.


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Por último, establecimos que la zona reguladora de PKC-e es suficiente para el suministro de vesículas de TNF+ al fagosoma. Estas investigaciones revelan una nueva función de la PKC-e en la exocitosis focal: su área reguladora conduce las vesículas derivadas del Golgi al fagosoma, mientras que el ejercicio catalítico es necesario para su fusión. Este es uno de los primeros ejemplos de un requisito de PKC para el tráfico vesicular y describe una nueva función para un área reguladora de PKC.

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La respuesta temprana IgG / IgA en pacientes hospitalizados con COVID-19 está relacionada con una enfermedad mucho menos extrema


Decidimos la cinética de la respuesta de anticuerpos anti-SARS-CoV-2 en quince pacientes COVID-19 hospitalizados. Los pacientes se dividieron en delicados/razonables (delicados, n = 1; razonables, n = 4) o extremos (n = 10) y se midieron las IgM anti-Nucleocápside, IgG anti-Spike e IgA anti-Spike específicas del virus en muestras seriadas de suero recogidas entre cero y 15 días después del ingreso hospitalario.

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ELISA-1
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FRIT-KIT
Column Packing Kit
PACK-KIT

Se llevaron a cabo ensayos de neutralización sustitutos probando la inhibición de la unión de ACE-2 a Spike. En tres pacientes (2 casos extremos y 1 caso razonable), se controlaron los anticuerpos séricos y la reminiscencia de células T 6 meses después del inicio. Aunque la respuesta IgM tendía a aparecer primero, los pacientes afectados por una enfermedad mucho menos extrema habían sido más susceptibles a una respuesta IgG/IgA precoz.

100 BP DNA LADDER, 500UL PER KIT
M-DNA-100BP CORNING
1 KB DNA LADDER, 500UL PER KIT
M-DNA-1KB CORNING
DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library
L1033-.1 ApexBio
DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library
L1033-.25 ApexBio
DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library
L1033-5 ApexBio

La neutralización de la unión de Spike a ACE2 se correlacionó con IgG e IgA anti-Spike. La respuesta de anticuerpos IgG e IgA continuó en el seguimiento de 6 meses. Se observó una respuesta de células T de recuerdo al antígeno Spike en 2 de cada 3 pacientes, no asociada a la gravedad de la enfermedad.

Protein A protein
Fitzgerald
pLDH Protein Protein
Abbexa
pLDH Protein Protein
Abbexa

Un caso de desmielinización mixta central y periférica asociada a anticuerpos IgG contra la neurofascina-155: Tratamiento eficaz con un anticuerpo monoclonal anti-CD20

La desmielinización central y periférica mixta (DCPC) es una entidad poco frecuente por la que se observa desmielinización en los métodos nerviosos central (SNC) y periférico (SNP). Probablemente, podría desarrollarse como resultado de un mecanismo inmune compartida o co-ocurrencia factible entre dos enfermedades desmielinizantes no relacionados se asemeja a un número de esclerosis (MS) y polineuropatía desmielinización inflamatoria persistente (CIDP).

Una pequeña parte de los pacientes con PDIC presentan autoanticuerpos contra proteínas nodales y paranodales similares a la neurofascina 155 (NF155). La NF actúa como molécula de adhesión celular entre las proteínas nodales y paranodales. La NF 155 glial coexiste en el SNP y el SNC y podría dar lugar a una desmielinización mixta.

Paraffin Wax Dispenser
Scientific Laboratory Supplies
Paraffin wax, granular (56 - 60)
Glentham Life Sciences
Paraffin wax, granular (56 - 60)
Glentham Life Sciences
MagSi-WAX
Magtivio
MagSi-WAX
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Aunque se han notificado casos de CIDP positivos para anticuerpos NF y se han recogido casos, la variedad de enfermos con manifestaciones manifiestas de desmielinización del sistema nervioso central podría ser muy baja en este grupo. Se cree que la respuesta a la inmunoglobulina intravenosa (IgIV) en la PDIC positiva a anticuerpos anti NF155 (NF155 +) es escasa. Rituximab, un anticuerpo monoclonal anti-CD20 dirigido a las células B, ha avanzado mucho en su tratamiento.

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Aquí presentamos un caso de anticuerpos IgG contra la neurofascina 155 asociados a la PDIC que respondió bien al rituximab. NF155 + CIDP normalmente afecta a los adultos jóvenes, y la administración temprana de la inmunoterapia adecuadamente mezclado puede prevenir la incapacidad extrema. Las pruebas de anticuerpos NF deben realizarse en pacientes que no responden al tratamiento con IgIV.

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Inmunoensayo de circulación lateral basado en SERS para la detección delicada y simultánea de anticuerpos IgM e IgG anti-SARS-CoV-2 mediante el uso de nanotags Raman mejorados con gap.
El inmunoensayo de circulación lateral (LFIA) ha desempeñado una función vital en el pronóstico temprano a través de la actual pandemia de COVID-19 debido a su simplicidad, velocidad y asequibilidad para la detección de anticuerpos de coronavirus.

Developing and validating a modified Enzyme linked Immunosorbent Assay Method for detecting HEV IgG antibody from Dried Blood Spot (DBS) samples in endemic settings
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Sin embargo, la sensibilidad de los LFIA comercializados debe mejorarse para prevenir la propagación de la infección. Aquí desarrollamos una tira de inmunoensayo de circulación lateral ultrasensible basada en la dispersión Raman mejorada en superficie (LFIA basada en SERS) para la detección simultánea de IgM e IgG anti-SARS-CoV-2 mediante el uso de nanoetiquetas Raman mejoradas por huecos (GERT).

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Las GERT con un orificio de 1 nm entre el núcleo y la cubierta se habían utilizado para proporcionar los “puntos abrasadores”, que ofrecían una mejora de unas 30 veces en comparación con las nanotags típicas. Los antígenos recombinantes COVID-19 se conjugaron en las superficies de los GERT y sustituyeron al oro coloidal normal para la detección Raman delicada de IgM e IgG humanas.

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Se descubrió que los LOD de IgM e IgG eran de 1 ng/mL y 0,1 ng/mL (aproximadamente 100 veces menos en comparación con las tiras LFIA disponibles en el mercado), respectivamente. Además, en el caso de un antígeno nanosuperficial muy extendido, las alertas SERS exactas demostraron la falta de fiabilidad de la cuantificación debido al efecto de interferencia de la IgM sobre la IgG.

Fuentes :

  1. Gentaur
  2. NCBI
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