Influencia de la composición del medio basal en la fidelidad de la barrera en modelos de barrera hematoencefálica derivados de células madre pluripotentes humanas

Cada vez se reconoce más que las células endoteliales microvasculares de la mente (BMEC), la parte principal de la barrera hematoencefálica (BBB), son extremadamente delicadas a las señales solubles de la corriente sanguínea y de la mente. Esta idea se extiende in vitro, donde el medio extracelular puede afectar a las propiedades de la BBB en las células tradicionales.

Sin embargo, no está claro hasta qué punto las circunstancias básicas de la tradición pueden tener un efecto sobre las propiedades de la BBB in vitro, lo que tiene implicaciones para la variabilidad y reproducibilidad del modelo, además de las evaluaciones posteriores del transporte molecular y los fenotipos de la enfermedad.

Custom development of ELISAs for other species or antibody isotypes not listed in the catalog. Custom testing of samples for IgG/IgM/IgA or total (IgG+IgM+IgA)
Alpha Diagnostics
Alpha-bungarotoxin, CF405s
Cusabio
Alpha-bungarotoxin, CF405s
Biotium
Alpha-bungarotoxin, CF680r
Biotium

Aquí, descubrimos esta idea mediante el análisis de las propiedades de la BBB dentro de las células humanas derivadas de células madre pluripotentes inducidas (iPSC) BMEC-como células traditiond bajo circunstancias libres de suero en DMEM / F12 y los medios de comunicación Neurobasal, que han descrito absolutamente composiciones.

Revelamos variaciones notables en cada una de las propiedades pasivas y vivas de la BBB como una operación de la composición del medio basal. Además, la secuenciación del ARN y los análisis del fosfoproteoma revelaron alteraciones en numerosas vías de señalización en respuesta a las variaciones del medio basal.

En general, nuestros resultados revelan que las circunstancias de la tradición de base pueden tener un profundo efecto en la eficiencia de las fórmulas de la BBB in vitro, y estos resultados deben ser considerados cuando se diseñan experimentos que hacen la mayor parte de tales fórmulas para el análisis fundamental y los ensayos preclínicos.

Custom development of ELISAs for other species or antibody isotypes not listed in the catalog. Custom testing of samples for IgG/IgM/IgA or total (IgG+IgM+IgA)
000-CUS Alpha Diagnostics
Alpha-bungarotoxin, CF405s
00002 Cusabio
Alpha-bungarotoxin, CF405s
00002-100ug Biotium
Alpha-bungarotoxin, CF680r
9-00003 Biotium


Especiación de nanopartículas de platino en numerosos medios de tradición celular mediante HPLC-ICP-TQ-MS y métodos complementarios: Una contribución a los ensayos toxicológicos


La investigación toxicológica de las nanopartículas (NPs) es extremadamente demandada hoy en día, sin embargo es muy difícil. Dentro de los ensayos in vitro, la comprensión de la posición de los medios de la tradición celular es esencial para derivar una interpretación correcta de los resultados toxicológicos y para tomar medidas, se necesitan nuevos instrumentos analíticos.

Custom development of ELISAs for other species or antibody isotypes not listed in the catalog. Custom testing of samples for IgG/IgM/IgA or total (IgG+IgM+IgA)
000-CUS Alpha Diagnostics
Alpha-bungarotoxin, CF405s
00002 Cusabio
Alpha-bungarotoxin, CF405s
00002-100ug Biotium
Alpha-bungarotoxin, CF680r
9-00003 Biotium
Alpha-bungarotoxin, CF680r
9-00003 Biotium

En este contexto, se ha desarrollado por primera vez una técnica analítica basada principalmente en la cromatografía líquida de fase inversa unida a la espectrometría de masas de triple cuadrupolo con plasma acoplado inductivamente (HPLC-ICP-TQ-MS) para la detección y caracterización de las PtNP de 5 y 30 nm, además de las especies iónicas de platino, en medios de tradición celular generalmente utilizados.

Para esta función, se han examinado el Medio Eagle Modificado de Dulbecco, DMEM-alta glucosa, DMEM-F12, DMEM 31053-028, y Roswell Park Memorial Institute, RPMI-1640 (suplementado con 10% de suero fetal bovino (FBS) y antibióticos) en varias ocasiones de incubación (24, 48 y 96 h a 37 °C).

Tras una cuidadosa optimización y eficacia analítica, la técnica desarrollada permite examinar simultáneamente el curso de oxidación, que da lugar a la descarga de especies iónicas, y el aumento de la cantidad hidrodinámica de PtNPs, muy probablemente asociado a la formación de entidades orgánicas recientes (corona de proteínas).

Custom Antibody titration by ELISA up to 2 rabbits and 1 bleed
ELISA-1 Alpha Diagnostics
Beta2-Microglobulin ELISA kit ELISA Kit
LF-EK60047 Abfrontier

Se descubrió que la magnitud de cada proceso dependía de los medios de la tradición celular examinada y de las ocasiones de incubación. La dispersión dinámica de la luz (DLS) y la microscopía electrónica de barrido de alta resolución (HR-SEM) se han utilizado como métodos complementarios para revisar la técnica vital de cada formación de la corona de proteínas suave y ardua.

La viabilidad de la HPLC-ICP-TQ-MS para obtener información relacionada con la investigación toxicológica se ha demostrado y en la luz de nuestros resultados, el efecto de los medios de la tradición celular en los hábitos de PtNPs no debe ser subestimado.

Custom Antibody titration by ELISA up to 2 rabbits and 1 bleed
ELISA-1 Alpha Diagnostics
Beta2-Microglobulin ELISA kit ELISA Kit
LF-EK60047 Abfrontier
Chicken thrombomodulin,TM ELISA KIT ELISA
QY-E80092 Qayee Biotechnology
Oxycodone ELISA
EK7130 BosterBio
Amphiphysin ELISA
LF-EK0189 Abfrontier

Medición de la carga de consumo de oxígeno (OCR) y de la carga de acidificación extracelular (ECAR) en células de tradición para evaluar el metabolismo de la vitalidad


Las células de mamíferos generan ATP mediante el metabolismo mitocondrial (fosforilación oxidativa) y no mitocondrial (glucólisis). La mayoría de las células cancerosas se identifican para reprogramar su metabolismo utilizando métodos totalmente diferentes para satisfacer las necesidades energéticas y anabólicas.

MULTIPLEX KIT PCR MASTITIS PCR kit
Bioingentech
MULTIPLEX KIT PCR MASTITIS PCR kit
Bioingentech
MULTIPLEX KIT PCR Babesia & Theileria PCR kit
Bioingentech
MULTIPLEX KIT PCR Babesia & Theileria PCR kit
Bioingentech
ranavirus PCR kit
Bioingentech
Influence of basal media composition on barrier fidelity within human pluripotent stem cell-derived blood-brain barrier models

Además, cada tejido canceroso tiene sus propias opciones metabólicas. Las mitocondrias no sólo juegan un papel clave en el metabolismo de la vitalidad, sino también en la regulación del ciclo celular.
Por lo tanto, las mitocondrias han surgido como un posible objetivo para el remedio contra el cáncer, ya que son estructuralmente y funcionalmente totalmente diferentes de sus homólogos no cancerosos.

Paraffin Wax Dispenser
Scientific Laboratory Supplies
Paraffin wax, granular (56 - 60)
Glentham Life Sciences
Paraffin wax, granular (56 - 60)
Glentham Life Sciences
MagSi-WAX
Magtivio
MagSi-WAX
Magtivio

Hemos elaborado un protocolo para la medición de la tasa de consumo de oxígeno (OCR) y la tasa de acidificación extracelular (ECAR) en las células residentes, utilizando el Analizador de Flujo Extracelular Seahorse XF24 (Determinación 1). El analizador de flujo extracelular Seahorse XF24 mide repetidamente el foco de oxígeno y el flujo de protones dentro del sobrenadante celular a lo largo del tiempo.

Estas mediciones se transforman en valores OCR y ECAR y permiten una cuantificación directa de la respiración mitocondrial y la glucólisis. Con este protocolo, buscamos evaluar el funcionamiento mitocondrial basal y el estrés mitocondrial de tres cepas celulares de cáncer totalmente diferentes en respuesta al compuesto citotóxico de control mensacarcin con vistas a examinar su mecanismo de movimiento.

Protein A protein
Fitzgerald
pLDH Protein Protein
Abbexa
pLDH Protein Protein
Abbexa

Las células se han chapado en placas de tradición celular XF24 y se han mantenido durante 24 h. Antes de la evaluación, el medio de tradición se cambió con DMEM sin amortiguar de pH 7,4 y las células se han dejado equilibrar en una incubadora sin CO2 inmediatamente antes de la evaluación del flujo metabólico utilizando el Seahorse XF para permitir mediciones exactas de los ajustes de la unidad Milli-pH.

OCR y ECAR se han medido por debajo de las circunstancias basales y después de la inyección de compuestos por los puertos de inyección de drogas. Con el protocolo descrito evaluamos los perfiles esenciales del metabolismo de la vitalidad de las tres cepas celulares además de los parámetros clave del funcionamiento mitocondrial en respuesta a nuestro compuesto de comprobación y mediante la adición secuencial de agentes perturbadores de las mitocondrias oligomicina, FCCP y rotenona/antimicina A. Determinación 1.Visión general del experimento Seahorse.

100 BP DNA LADDER, 500UL PER KIT
M-DNA-100BP CORNING
1 KB DNA LADDER, 500UL PER KIT
M-DNA-1KB CORNING
DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library
L1033-.1 ApexBio
DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library
L1033-.25 ApexBio
DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library
L1033-5 ApexBio


Resultados citotóxicos y antiinflamatorios del quitosano y la gelatina hemostática en la tradición celular oral


El quitosano es un biopolímero con impacto bactericida/bacteriostático, biocompatible y biodegradable. Se ha utilizado en la ingeniería tisular para intercambiar tejidos parcial o totalmente liberando suministros bioactivos o influyendo en el desarrollo celular, a menudo en la medicina regenerativa y la odontología.

El objetivo de este estudio era evaluar el impacto citotóxico y antiinflamatorio del quitosano solo o con gelatina hemostática (Spongostand®) en cultivos de células pulpares humanas (HPC), fibroblastos gingivales humanos (HGF) y preosteoblastos de ratón (MC3T3-E1, ATCC).

Las HPC y los HGF se obtuvieron a partir de pacientes. Las células se han subcultivado en DMEM. Se inoculó quitosano en concentraciones totalmente diferentes (0-0,5%) y se colocaron gelatinas hemostáticas impregnadas de quitosano (0,19%) en presencia de las células y se incubaron durante 24 horas.

La viabilidad de las células se decidió mediante la técnica MTT y se calculó el foco citotóxico implícito (CC50) a partir de la curva dosis-respuesta. El impacto antiinflamatorio se calculó a partir del maniquí de gingivitis in vitro inducido con interleucina 1beta (IL-1β) en HGF y la detección de proteínas.

Custom Antibody titration by ELISA up to 2 rabbits and 1 bleed
ELISA-1
Frit Kit
FRIT-KIT
Column Packing Kit
PACK-KIT

La información se ha sometido a los exámenes de Shapiro-Wilk, Kruskal-Wallis y Mann-Whitney. Los experimentos se han realizado por triplicado de tres ensayos imparciales. La viabilidad celular de las HPC, HGF y MC3T3-E1 implicadas en el quitosano disminuyó considerablemente (p<0,05).

Las HPC han sido probablemente las más delicadas (CC50= 0,18%), adoptadas por el HGF (CC50= 0,18%) y el MC3T3-E1 (CC50= 0,19%). La citotoxicidad de las gelatinas impregnadas de quitosano disminuyó la viabilidad celular de HGF y HPC en un 11% y un 5%, respectivamente. El impacto proinflamatorio disminuyó considerablemente en el maniquí de la gingivitis.

Para concluir, el quitosano induce resultados citotóxicos razonables solo o con gelatina hemostática al 0,19%, en método dependiente de la dosis, con resultados antiinflamatorios en fibroblastos gingivales humanos. El uso del quitosano como biomaterial podría ser una alternativa maravillosa para ser utilizada en la odontología regenerativa

Custom Antibody titration by ELISA up to 2 rabbits and 1 bleed
Alpha Diagnostics
Frit Kit
Next Advance
Column Packing Kit
Next Advance

Fuentes

  1. Gentaur
  2. NCBI

Leave a Reply

Your email address will not be published. Required fields are marked *

Related Post

El aumento de los niveles de FGF-23 está relacionado con una eritropoyesis ineficaz y una mineralización ósea deficiente en los síndromes mielodisplásicosEl aumento de los niveles de FGF-23 está relacionado con una eritropoyesis ineficaz y una mineralización ósea deficiente en los síndromes mielodisplásicos

Los síndromes mielodisplásicos (SMD) son problemas hematopoyéticos clonales malignos en ancianos caracterizados por una hematopoyesis ineficaz. Esto se acompaña de un microambiente óseo alterado, que contribuye al desarrollo de los