Respuestas toxicológicas de células BEAS-2B a exposiciones repetidas a benceno, tolueno, m-xileno y mesitileno utilizando el método de interfaz aire-líquido

En un esfuerzo por reducir la exposición a sustancias químicas tóxicas, el reglamento europeo REACH (1907/2006) recomienda sustituir las moléculas tóxicas por compuestos mucho menos peligrosos para el bienestar humano y el medio ambiente.

El tolueno es probablemente uno de los disolventes más utilizados en la industria a pesar de su toxicidad. El objetivo de este estudio es aumentar la percepción y examinar la toxicidad del tolueno y sus homólogos en un maniquí de células bronquiales. Para ello, se expusieron células bronquiales humanas BEAS-2B a vapores de tolueno, m-xileno, mesitileno (1,3,5-trimetilbenceno) y benceno (20 y 100 ppm).


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La publicidad se llevó a cabo utilizando un sistema de interfaz aire-líquido (ALI) (Vitrocell) a lo largo de 1 h/día durante 1, 3 ó 5 días. Se evaluaron la citotoxicidad, la expresión génica de enzimas del metabolismo xenobiótico y la respuesta inflamatoria tras las exposiciones celulares. La publicidad de las células BEAS-2B al tolueno y sus homólogos reveló la implicación de vías metabólicas principales (CYP2E1) y secundarias (CYP1A1).


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A partir del tercer día se midió una inducción tardía de genes (EPHX1, DHDH, ALDH2 y ALDH3B1) que podría estar relacionada con la formación de metabolitos. También se observó un aumento de la secreción de marcadores inflamatorios (TNF-α, IL-6, IL-8, MCP-1 y GM-CSF).

Paralelamente, se estudió la regulación entre los mediadores inflamatorios y la expresión de la glucoproteína transmembrana mucina MUC1. Este método in vitro con el sistema ALI pone de manifiesto la importancia de realizar exposiciones repetidas para detectar posibles resultados tardíos. La distinción registrada tras la publicidad celular al tolueno y sus homólogos pone de relieve la importancia del precepto de sustitución.

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La dihidrodiol deshidrogenasa dimérica es una 1,5-anhidro-D-fructosa reductasa de primates respetuosa con el medio ambiente.


La 1,5-anhidro-D-fructosa (AF), un metabolito de la vía de la anhidrofructosa del metabolismo del glucógeno, acaba de demostrar que reacciona con las proteínas intracelulares y forma productos finales de glicación superior. El AF reactivo es metabolizado a 1,5-anhidro-D-glucitol no reactivo por la AF reductasa en tejidos animales y células humanas.

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Se han caracterizado las AF reductasas de cerdo y ratón, pero se desconoce la de los primates. Aquí examinamos el ejercicio reductor de AF de 11 reductasas dependientes de NADPH de primates con amplia especificidad de sustrato para compuestos carbonílicos.

La FA fue disminuida por la dihidrodiol deshidrogenasa dimérica de mono (DHDH), la aldehído reductasa humana (AKR1A1) y la dicarbonil/L-xilulosa reductasa humana (DCXR). La DHDH confirmó el OkM inferior (21 μM) para el AF, y su valor okcat/OkM (1208 s-1mM-1) fue mucho mayor que los de la AKR1A1 (1,3 s-1mM-1), la DCXR (1,1 s-1mM-1) y las AF reductasas de cerdo y ratón.

100 BP DNA LADDER, 500UL PER KIT
M-DNA-100BP CORNING
1 KB DNA LADDER, 500UL PER KIT
M-DNA-1KB CORNING
DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library
L1033-.1 ApexBio
DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library
L1033-.25 ApexBio
DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library
L1033-5 ApexBio

La AF es un nuevo sustrato con mayor afinidad y eficacia catalítica que los sustratos reconocidos de la DHDH. El examen de simulación de acoplamiento aconsejó que Lys156 dentro del sitio web de unión al sustrato de DHDH contribuye a la afinidad excesiva para AF. Las búsquedas en bases de datos de genes reconocieron homólogos de la DHDH (con >95% de identificación de la secuencia de aminoácidos) en personas y simios. Así pues, la DHDH actúa como una AF reductasa respetuosa con el medio ambiente en primates.

Coexistencia de la enfermedad de Dupuytren y neoplasias malignas: una visión general.


La enfermedad de Dupuytren se evalúa como una fibromatosis superficial benigna, en la que se produce una proliferación extrema de miofibroblastos y la formación de nódulos y cordones, adoptada por la mejora de las contracturas de los dedos. Las similitudes entre la enfermedad de Dupuytren y las neoplasias se han demostrado a nivel molecular y científico.

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Alpha Diagnostics
Alpha-bungarotoxin, CF405s
Cusabio
Alpha-bungarotoxin, CF405s
Biotium
Alpha-bungarotoxin, CF680r
Biotium

El objetivo de este estudio era revisar la literatura que investiga la posible relación entre la incidencia de la enfermedad de Dupuytren y las neoplasias. La evaluación de los pocos documentos accesibles muestra

(1) una mortalidad por neoplasias malignas estadísticamente elevada entre los varones con enfermedad de Dupuytren superior, en comparación con los habitantes de referencia y los varones con enfermedad en estadio temprano,

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000-CUS Alpha Diagnostics
Alpha-bungarotoxin, CF405s
00002 Cusabio
Alpha-bungarotoxin, CF405s
00002-100ug Biotium
Alpha-bungarotoxin, CF680r
9-00003 Biotium

(2) una morbilidad por neoplasias malignas estadísticamente elevada, asociada principalmente al tabaquismo y al consumo de alcohol entre los pacientes (mujeres y hombres) operados de la enfermedad de Dupuytren y

(3) elevada morbilidad por sarcoma óseo y tejido blando en pacientes 5 años después de la operación por enfermedad de Dupuytren. Algunas investigaciones genéticas presentan además una expresión alterada de los genes de las deshidrogenasas ALDH2 y DHDH en pacientes con enfermedad de Dupuytren y con tumores malignos del tracto digestivo asociados al abuso del alcohol.
Investigación de la función de Arg301 reconocido dentro de la construcción de rayos X de la fosfito deshidrogenasa.

Protein A protein
Fitzgerald
pLDH Protein Protein
Abbexa
pLDH Protein Protein
Abbexa


La fosfito deshidrogenasa (PTDH) de Pseudomonas stutzeri cataliza la oxidación dependiente de nicotinamida adenina dinucleótido de fosfito a fosfato. La enzima pertenece a la familia de las D-hidroxiácido deshidrogenasas (DHDHs).

Toxicological responses of BEAS-2B cells to repeated exposures to benzene, toluene, m-xylene, and mesitylene using air-liquid interface method
Paraffin Wax Dispenser
Scientific Laboratory Supplies
Paraffin wax, granular (56 - 60)
Glentham Life Sciences
Paraffin wax, granular (56 - 60)
Glentham Life Sciences
MagSi-WAX
Magtivio
MagSi-WAX
Magtivio

Una búsqueda en las bases de datos de proteínas descubrió muchas otras fosfito deshidrogenasas putativas. Se han clonado y expresado los genes que codifican 4 candidatas numerosas, y se han purificado y caracterizado las enzimas. Todas oxidaban fosfito a fosfato y tenían parámetros cinéticos relacionados, a pesar de un bajo nivel de identificación de secuencias por pares (39-72%).

Una última construcción cristalina reconoció Arg301 como un residuo dentro del sitio web energético que no había sido investigado con anterioridad. Arg301 es absolutamente conservado dentro de las enzimas demostrado aquí para ser PTDHs, sin embargo, el residuo no debe ser conservado en diferentes DHDHs

MULTIPLEX KIT PCR MASTITIS PCR kit
Bioingentech
MULTIPLEX KIT PCR MASTITIS PCR kit
Bioingentech
MULTIPLEX KIT PCR Babesia & Theileria PCR kit
Bioingentech
MULTIPLEX KIT PCR Babesia & Theileria PCR kit
Bioingentech
ranavirus PCR kit
Bioingentech

Evaluación cinética de sitio dirigido mutantes de este residuo muestra que es crucial para el medio ambiente de catálisis, con un ~ 100 veces menor en ok(cat) y un casi 700 veces mayor en Ok(m,fosfito) para el mutante R301A. Al parecer, el mutante R301Ok mostró una apenas mayor ok(cat) que el padre o la madre PTDH, y un aumento más modesto en Ok(m) para fosfito (prácticamente 40 veces).

Teniendo en cuenta estos resultados, Arg301 también podría estar implicado en la unión y la orientación del sustrato fosfito y / o desempeñar una función catalítica por medio de interacciones electrostáticas. Tres residuos diferentes dentro de la zona del sitio web energético que se conservan en el PTDH orthologs pero no DHDHs se han reconocido (Trp134, Tyr139, y Ser295).

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ELISA-1 Alpha Diagnostics
Beta2-Microglobulin ELISA kit ELISA Kit
LF-EK60047 Abfrontier

La importancia de los residuos que se investigó, además, por el sitio de mutagénesis dirigida. Todos los mutantes tenían valores de ok(cat) muy parecidos a los de la enzima de tipo salvaje, lo que indica que estos residuos no suelen ser necesarios para la catálisis.

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ELISA-1 Alpha Diagnostics
Beta2-Microglobulin ELISA kit ELISA Kit
LF-EK60047 Abfrontier
Chicken thrombomodulin,TM ELISA KIT ELISA
QY-E80092 Qayee Biotechnology
Oxycodone ELISA
EK7130 BosterBio
Amphiphysin ELISA
LF-EK0189 Abfrontier


Comparación de los rangos de expresión de genes mentales en animales domesticados y salvajes.


La domesticación ha dado lugar a ajustes relacionados en la morfología y la conducta en una serie de especies animales, lo que plantea la cuestión de si las similitudes entre completamente diferentes ocasiones domesticación, además, existen en la etapa molecular.

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Alpha-bungarotoxin, CF405s
00002 Cusabio
Alpha-bungarotoxin, CF405s
00002-100ug Biotium
Alpha-bungarotoxin, CF680r
9-00003 Biotium
Alpha-bungarotoxin, CF680r
9-00003 Biotium

Se utilizó la secuenciación de ARNm para investigar los patrones de expresión génica de todo el genoma en la corteza frontal de la mente en tres pares de especies domesticadas y salvajes (caninos y lobos, cerdos y jabalíes, y conejos domesticados y salvajes). Contrastamos las variaciones de expresión con las existentes entre cobayas domesticadas y un pariente salvaje lejano (Cavia aperea), además de entre dos rastros de ratas elegidas por su docilidad o agresividad hacia las personas.

Se observaron pocas variaciones en la expresión génica entre cobayas, cerdos y conejos domésticos y salvajes (entre 30 y 75 genes (menos del 1%) de los genes expresados tenían expresión diferencial), mientras que las cobayas y C. aperea presentaban diferencias más acusadas.

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Prácticamente no se descubrió solapamiento entre los genes con expresión diferencial en las distintas ocasiones de domesticación. Además, los análisis conjuntos de todas las muestras domesticadas y salvajes ofrecieron únicamente pruebas sugestivas de la existencia de un pequeño grupo de genes que modificaban su expresión de forma similar en numerosas especies domesticadas.

Probablemente, el más excesivo de esos ajustes de expresión compartidos encarnan la regulación al alza en los domesticados de SOX6 y PROM1, dos moduladores de la mejora de la mente. Casi no hubo solapamiento entre la expresión génica de los animales domesticados y la de las ratas mansas y agresivas.

Fuentes :

  1. Gentaur
  2. NCBI
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